质粒载体改造有哪些策略

1. 质粒引物设计：质粒引物的设计是改造基因的关键步骤，一般采用合成方法制备可以与相应基因特异性结合的引物。 2. 基因克隆：将希望改造的基因从原始DNA中分离出来，然后将其克隆到表达宿主中。 3. 新型表达体构建：使用新的表达体来替代原有的表达体，以便在不影响原有生理功能的情况下进行相应修饰。 4. 转录/翻译修饰：使用一些方法对相应基因进行修饰、优化或重新定义其功能。如RNA干扰、小核RNA干扰、siRNA干扰、antisense RNA干扰、knock-in/knock-out技术等。 5. 启动子修饰：对原有启动子进行优化或重新定义来影响相应基因产物水平。 6. 抗性修饰：将外源性抗生素作为标志物在相应位点上进行保留或者删除来实现对外界不同水平的耐受性。