1. 质粒引物设计:质粒引物的设计是改造基因的关键步骤,一般采用合成方法制备可以与相应基因特异性结合的引物。
2. 基因克隆:将希望改造的基因从原始DNA中分离出来,然后将其克隆到表达宿主中。
3. 新型表达体构建:使用新的表达体来替代原有的表达体,以便在不影响原有生理功能的情况下进行相应修饰。
4. 转录/翻译修饰:使用一些方法对相应基因进行修饰、优化或重新定义其功能。如RNA干扰、小核RNA干扰、siRNA干扰、antisense RNA干扰、knock-in/knock-out技术等。
5. 启动子修饰:对原有启动子进行优化或重新定义来影响相应基因产物水平。
6. 抗性修饰...
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